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    綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)

    簡要描述:綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)廣泛分布于食品、飼料、化妝品等,與人們的生活息息相關,其中食品和飼料所占的比例大。肉及肉制品摻假成為世界各國共同關注的熱點問題, 肉食品及其飼料的安全隱患直接關系到人類的安危。近幾十年來,以 PCR 技術為核心的動物源性成分檢測獲得了廣泛應用。
    本試劑盒適用于動物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測

    • 產  地:上海
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2021-06-03
    • 訪  問  量:326

    詳細介紹

    品牌自營品牌貨號HXG723
    規格50T供貨周期現貨
    主要用途科研使用應用領域生物產業

               綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)

    通用名稱:綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)

    【包裝規格】50T/盒

    【檢驗原理】本試劑盒采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術,設計一對綿羊CYTB基因保守區特異性引物結合一條特異性探針,用熒光PCR技術對山綿羊CYTB基因保守區的DNA進行體外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。

    綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)【試劑組成】

    酶液

    50μL×1 管

    CYTB反應液

    500μL×2 管

    CYTB陽性質控品

    50μl ×1 管

    陰性質控品

    250μl×1 管

    注:

    1) 不同批號試劑不能混用。

    2) 試劑盒內各試劑組份足夠包裝規格所標示的檢測次數。

    【儲存條件及有效期】

    -20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次。有效期 12 個月。

    【適用儀器】

    ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycle、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

    【標本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

    【保存和運輸】上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2-8℃冰袋運輸

    1. 樣品處理(樣本處理區)

    取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL  1.5mL 滅菌離心管中。

    1.2 核酸提取

    1.3 核酸提取采用核酸提取或純化試劑磁珠法或離心柱法,請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

    2. 試劑配制(試劑準備區)

    根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

     

    步驟

    循環數

    溫度

    時間

    收集熒光信號

    1

    1 cycle

    95℃

    10min

    2

    40 cycles

    94℃

    15sec

    55℃

    30sec

    5. 結果分析判定

    • 結果分析條件設定

    設置 Baseline  Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現整體傾斜時,根據分析后圖像調節 Baseline  start (一般可在 3~15 范圍內調節)、stop (一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold  Value (上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

    5.2 判斷

    a) 檢測通道 Ct 35,有 FAM 熒光信號檢出,并出現典型的擴增曲線,判斷樣品為陽性。

    b)  30<Ct ≤35 時,且有典型的擴增曲線時,則需重復實驗。再次擴增后檢測體系的Ct 值仍≤35,且有典型的擴增曲線,則判定該樣品含有相應的動物源性成分。當再次擴增后,檢測體系 Ct 值>35,或無典型的擴增曲線,則判定該樣品不含相應的動物源性成分。

     6. 質控標準

    a) 空白對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現典型的擴增曲線。

    b) 陰性對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現典型的擴增曲線。

    c) 陽性對照:有 FAM 熒光信號檢出,并出現典型的擴增曲線,Ct 值<30。

    d) 以上應同時滿足,否則本次實驗無效。

    綿羊CYTB基因試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項】

    Ø 所有操作嚴格按照說明書進行;檢驗過程中,參照《GB/T 27403 實驗室質量控制規范 食品分子生物學檢測》的規定進行。

    Ø 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;

    Ø 反應液應避光保存;

    Ø 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

    Ø 使用一次性吸頭、一次性手套和各區工作服;

    Ø 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染;

    Ø 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

    Ø 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全   通則》進行處理。

    .

    滬崢PCR優勢:

        1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保
    所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測。

        2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證。

        3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

        4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

     

    P CR實驗概述

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